Hibridomos ląstelių ekspansijos ir subklonavimo terpė 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

产品信息 Prekės aprašymas

产品名称

Produkto pavadinimas

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Hibridomos ląstelių ekspansijos ir subklonavimo terpė

货号 Kat. Nr

BRS-MED02

规格

Specifikacija

500 ml / g

500 ml / buteliukas

产品组分

Komponentai

DMEM基础培养基: 80 % (体积比)

DMEM bazinė terpė: 80 % (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Jaučio vaisiaus serumas (FBS, importuotas): 10 % (t/v)

条件培养基:10%(体积比)

Kondicionuota terpė: 10 % (t/v)

青霉素: 100 单位/ml

Penicilinas: 100 V/mL

链霉素: 100 单位/ml

Streptomicinas: 100 V/mL

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Kiti priedai: pavieniai{0}}ląstelių dauginimosi faktoriai ir mažų molekulių papildai

保存条件

Laikymo sąlygos

-20 laipsnių 保存, 有效期 18 个月.

Laikyti -20 laipsnių temperatūroje, tinkamumo laikas 18 mėnesių

使用方法

Naudojimo instrukcijos

培养基融化:

37 laipsnių 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象, 静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Terpės atšildymas:

Atšildykite terpę 37 laipsnių vandens vonioje. Išorinį paviršių nuvalykite 70% etanoliu ir padėkite į biologinės saugos spintelę naudojimui.
Pastaba: Nedidelis baltos flokuliuojančios medžiagos kiekis po atšildymo yra normalus. Leiskite terpei nusistovėti 3–5 minutes, kad flokai nusistovėtų, tada surinkite supernatantą naudojimui.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0.8-1.5cell/孔/200ul培养基铺杺

Fusion šulinių tvarkymas – sveikos ląstelės:

Jei suliejimo šuliniai yra geros būklės ląstelėmis (pvz., vidutinės spalvos normalios arba šiek tiek geltonos, ląstelės po mikroskopu atrodo sveikos, ryškios ir normalaus dydžio), švelniai pipete pipete aukštyn ir žemyn geltonu pipetės antgaliu. Suskaičiuokite ląsteles ir plokštelę 0,8–1,5 ląstelės duobutėje 200 µl terpėje.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Fusion šulinių tvarkymas – neoptimalios ląstelės:

Suliejimo šuliniuose, kurių ląstelės yra neoptimalios būklės (pvz., vidutiniškai parūgštintos / geltonos arba ląstelės atrodo susitraukusios, tamsios mikroskopu), galimi du tolesnio subklonavimo variantai:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1.5cell/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

1 variantas: perkelkite ląsteles iš suliejimo šulinio į 24 šulinėlių plokštelę, kurioje yra 1 ml šios terpės. Po 2–3 dienų išplėtimo suskaičiuokite ląsteles ir subklonuokite 0,8–1,5 ląstelės/šulinėlio 200 µL terpėje. Šiame etape ląstelių padvigubėjimas yra ribotas, tačiau ląstelių būklė yra gera, todėl ji idealiai tinka subklonavimui.

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培,庁5%37培CO2静置培养3-4小时,然后取样细胞计数后进行亚克隆(0.8-1.5cell/孔/200ul培养基);

Geltonu pipetės antgaliu atsargiai pašalinkite supernatantą iš suliejimo šulinėlio ir į kiekvieną duobutę įpilkite 200 µL šviežios terpės. Inkubuokite 37 laipsnių temperatūroje, 5% CO₂ 3–4 valandas. Tada paimkite ląstelių mėginius, suskaičiuokite ir subklonuokite 0,8–1,5 ląstelės/šulinėlio 200 µL terpėje.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Pastaba: subklonai, kultivuoti naudojant hibridinės ląstelių išplėtimo ir subklonavimo terpę, paprastai pasiekia stadiją, tinkamą tolesniam atrankai ar analizei, 6–8 dienomis po{2}}subklonavimo.