Peptidinė nukleino rūgštis (PNA) yra dirbtinė nukleorūgšties molekulė, kuri, palyginti su natūralia DNR ir RNR, turi įvairių pranašumų, tokių kaip didelis selektyvumas, stiprus afinitetas ir stabilumas. Kietosios fazės sintezė yra vienas iš pagrindinių PNA sintezės metodų su šiais specifiniais etapais:
Tinkamų apsauginių grupių parinkimas: Apsauginių grupių reakcija su amino arba karboksilo grupėmis ant PNA pirmtako, kad susidarytų apsauginių grupių esteriai arba amidai.
Jungimas prie polimerinės dervos: PNA pirmtakas, modifikuotas apsaugine grupe, yra prijungtas prie polimerinės dervos, paprastai naudojant polimerinę dervą, kurios anglies grandinės ilgis yra 20-30 aminorūgščių liekanų.
Sintezės ciklo kartojimas: įskaitant N-galo apsauginės grupės pašalinimą; Pridėkite kitą aminorūgščių vienetą; Dar kartą atlikite N gnybtų apsaugą.
Apsaugos pašalinimas ir atskyrimas: Po sintezės PNA peptidinė grandinė atskiriama nuo polimerinės dervos šarminio apdorojimo arba rūgštinės hidrolizės būdu, o visos apsauginės grupės pašalinamos, kad būtų gautas PNA produktas.
Šiuo metodu galima efektyviai susintetinti iki kelių šimtų nukleotidų ilgio PNA molekules, o susintetinti produktai yra labai gryni, todėl tinkami didelio masto gamybai.
Tačiau praktikoje PNA grynumas, sukauptas bendrais automatiniais sintezatoriais, nėra idealus HiPep tyrimų institutas sukūrė naują sintetinį metodą, kuris gali pateikti labai grynus PNA produktus. Šis metodas išsprendžia kai kurias tradicinės sintezės problemas, tokias kaip brangios komponentų kainos, lengvas steriškas apsauginių grupių trukdymas ir reikšmingas monomero grynumo poveikis tikslinės PNA biologiniam aktyvumui. Standartinis sintezės diapazonas yra 10-15 bazių, o sintezei. daugiau nei 16 bazių, tai specialus užsakymas, reikalaujantis atskiro kontakto su tiekėju
Be to, PNA sintezė taip pat apima skirtingus modifikavimo metodus, tokius kaip fluorescencinis modifikavimas, biotino modifikavimas, peptidų modifikavimas, glikozilinimas ir DNR modifikavimas, siekiant patenkinti skirtingus tyrimų poreikius. Todėl labai svarbu pasirinkti tinkamus sintezės metodus ir metodus, pagrįstus konkrečiu pritaikymu. scenarijai ir reikalavimai.
